Obsah přednášky (1) Vlastnosti chemických sloucenin ve vztahu ke strukture (Jegorov nebo Šimek), 2hod. Vazebné a nevazebné interakce, fyzikálne-chemické vlastnosti látek a jejich praktický význam, ve vztah ke strukture. Elektronová struktura, polarita, reaktivita funkcních skupin, hmotnost, rozpustnost, body varu-tání, acidobazické, oxidacne-redukcní vlastnosti, absorpce a emise zárení. Symetrie. (2) Praktické aspekty prípravy vzorku k analýze (Šimek), 2 hod. Odber, zpracování a uchovávání biologického vzorku. Zachycování tekavých látek (headspace analýza, termální desorpce, SPME, CLS aj.). Obecné metody extrakce látek, extrakce kapalina-kapalina, SPE, superkritická extrakce. Opatrení proti kontaminaci a degradaci vzorku. Požadavky stopové analýzy. (3) Instrumentální metody pro separaci malých molekul (Šimek), 2 hod. Přehled separacních metod. Chromatografické metody-PC, TLC, analytická a preparativní kapalinová chromatografie, kapilární GC, SFC, iontová chromatografie. Elektromigracní metody. Postavení a význam jednotlivých separacních metod a jejich uplatnení v analýze sloucenin, dostupnost, casové a nákladové požadavky. (4) Kapilární plynová chromatografie (Šimek), 2 hod. Mechanismy separace, chromatografické materiály, jejich vlastnosti a oblasti použití. Podmínky separace a optimalizace na kapilárních kolonách. Identifikace pomocí retencních indexu. Zpusoby dávkování, kolony, detektory. (5) Kapalinová chromatografie v systémech s normálními a obrácenými fázemi, (Šimek), 2 hod. Chromatografické materiály, jejich vlastnosti a oblasti použití. Podmínky separace látek na analytických, mikrokolonových a preparativních kolonách. Chromatografie v plošném usporádání, na cipu. Optimalizace chromatografického deje, praktické prístupy k vyhodnocení chromatografických dat. (6) Spektrální instrumentální metody (Jegorov), 2 hod. UV, CD, IR, MS, NMR, EPR, difrakcní metody, AAS, ICP. Jejich postavení v kontextu ostatních metod, dostupnost, cena stanovení, casová a mentální nárocnost. (7) Hmotnostní spektrometrie (Šimek), 2 hod. Zpusoby ionizace molekul- EI, ESI, MALDI, analyzátory hmot, typy cástic, tandemová MS. Vzhled hmotnostního spektra, základy jeho interpretace. (8) Spektroskopie ve viditelné a ultrafialové oblasti (Jegorov), 2 hod. Typy prechodu, intenzita pásu, vztah k prítomnosti funkcních skupin, konjugace, indukcní a mezomerní efekt, chiralita. (9) Spektroskopie v infracervené oblasti (Jegorov), 2 hod. Spektra plynné, kapalné a pevné fáze. Vliv prípravy vzorku na spektra. Charakteristické vibrace vybraných funkcních skupin. Vztah symetrie a intenzity v IR a Ra spektrech. Použitelnost oblasti otisku prstu. Pozice pásu ve vztahu ke strukture v pevném stavu. (10) Spektra NMR a EPR (Jegorov), 2 hod. 1H a 13C NMR spektra, multiplicita-vztah k poctu a typu sousedu, konstanty spin-spinové interakce, základní orientace v 1D spektrech. 2D techniky ve vztahu ke strukture-COSY, ROESY, HETCOR. Odvození konformace molekuly v roztoku - NOE. Dynamické procesy v NMR. Možnost merení jiných jader než 1H a 13C. Monitorování vazby ligand-receptor. Merení smesí biologického puvodu. Použití EPR spekter a znacení molekul volnými radikály. (11) Difrakcní metody (Jegorov), 2 hod. Techniky pro merení monokrystalu a práškové metody. Empirické korelacní rady, vliv krystalové formy na vlastnosti (polymorfie, tvorba solvátu). Predpoklady pro vyrešení absolutní konfigurace. Stanovení struktur receptor-ligand, vztah k reálným biologickým systémum. (12) Interpretace hmotnostních spekter (Šimek), 2 hod. Základy interpretace hmotnostních spekter. Isotopy, molekulární ion, fragmentové ionty v EI, CI spektrech, ESI, MALDI spektrech, MS/MS spektra, MSn spektra. (13) Mikrochemické techniky, automatizace instrumentálních metod, metody zpracování výsledku (Šimek), 2 hod. Derivatizacní a degradacní metody (mikroreakce), transformace funkcních skupin prírodních látek a její využití pri identifikaci a analýze sloucenin. Praktický prístup k vyhodnocování dat. Správná lab
|